廣州沃霖承接細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室工程

廣州沃霖承接細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室工程

一、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與布局
 

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能進(jìn)行六方面的工作：無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒自凈處理、儲藏。
1．無菌操作區(qū)
（1）無菌操作區(qū)：無菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域，能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。
理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分：
a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境，同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c) 無菌操作間—―于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過高（不超過2.5m）以保證紫外線的有效自凈效果；墻壁光滑*以便清潔和消毒。工作臺安置不應(yīng)靠墻壁，臺面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
（2）凈化工作臺：操作簡單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式 b)外流式或稱水平層流式。
2．孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴(yán)格，但仍需清潔無塵，因此也應(yīng)設(shè)置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進(jìn)行，后者費(fèi)用高，一般實(shí)驗(yàn)室多采用孵箱進(jìn)行工作。
3．制備區(qū)
在該區(qū)主要進(jìn)行培養(yǎng)液及有關(guān)培養(yǎng)用的液體等的制備。
4．儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無塵。
5．清洗和消毒自凈區(qū)
清潔和消毒自凈區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開，主要進(jìn)行所有細(xì)胞培養(yǎng)器皿的清洗、準(zhǔn)備、消毒及三蒸水制備等工作。

二、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)
 

一）．洗滌技術(shù) 
1．洗滌液 
鉻酸洗滌液是用重鉻酸鉀(K2Cr2O7)與硫酸(H2SO4)配制而成，可根據(jù)需要配制成弱、中、強(qiáng)三種。
弱 用重鉻酸鉀50g加入蒸餾水1L，加熱溶化，冷卻后再緩慢加入濃硫酸90ml。
中 用重鉻酸鉀50g加入蒸餾水100ml，加熱溶化，冷卻后再緩慢加入濃硫酸875ml。
強(qiáng) 與濃硫酸加熱的同時(shí)緩慢加入磨碎的重鉻酸鉀，直到重鉻酸鉀達(dá)到飽和為止。一般濃硫酸1L加入重鉻酸鉀50g。
2．洗滌方法
玻璃器皿洗滌 
塑料用品洗滌 
金屬用品洗滌

二）．自凈、消毒技術(shù)
處理方法：物理自凈 干熱、濕熱、射線處理、物理除菌 過濾、離心沉淀等
化學(xué)方法：消毒劑、抗菌素自凈
1．培養(yǎng)基自凈 
2．玻璃器皿自凈 
3．金屬用具自凈 
4．接種室自凈 
5．外植體自凈 

幾種常用消毒劑的效果比較